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一、TOYOPEARL Sulfate-650F的簡(jiǎn)介
1. 帶有硫酸根官能團(tuán)的陽離子交換填料
? 官能團(tuán)為硫酸根(SO4-) ,與S-、SP-和CM-等類型相似,同為陽離子交換填料。
? 對(duì)抗體等蛋白有很高的吸附載量。
2. 可有效去除抗體中的多聚體
? 相較于其他陽離子交換填料,對(duì)多聚體有著更高的分離效果。
? 在pH低于5.0、并含有0.15 mol/L的NaCl緩沖液中仍然可以結(jié)合抗體,具有耐鹽性。
? 可作為Protein A層析的后續(xù)純化步驟。
3. 有類似于肝素親和填料的分離純化效果
? 可以應(yīng)用于AT-III和其他相關(guān)蛋白的分離純化。
? 有望應(yīng)用于病毒和疫苗的分離純化。
4. 適用的緩沖液pH范圍
? 一般可以用于pH 4-12的緩沖液中。
? 可以用pH 3-13的清洗液進(jìn)行短時(shí)間的CIP處理。
二、TOYOPEARL Sulfate-650F的基本參數(shù)
性能指標(biāo) | 規(guī)格參數(shù) |
蛋白吸附載量 靜態(tài) 動(dòng)態(tài) | ≥114g/L(human IgG) ≥95g/L |
離子交換容量 | ≥0.53eq/L |
粒徑 | ≥80%(30-60μm) |
菌落總數(shù) | ≤100 CFU/ml |
內(nèi)毒素等級(jí) | ≤10.0 EU/ml |
不溶物 | ≤0.2%(干膠) |
異物(colored) | ≤6 顆粒 |
出貨溶劑:含0.2mol/L醋酸鈉的20%乙醇溶液
三、TOYOPEARL Sulfate-650F適用樣品
? 單克隆抗體
? 血漿蛋白、凝血因子
? 病毒、VLP、疫苗
? 重組蛋白
? 堿性蛋白
四、TOYOPEARL Sulfate-650F的主要特點(diǎn)
? 高載量
? 多聚體分離
? 耐鹽的陽離子交換填料
? 與肝素親和作用相似(硫酸根官能團(tuán))
五、TOYOPEARL Sulfate-650F的應(yīng)用條件
1. 單克隆抗體多聚體的分離純化
? 對(duì)IgG可達(dá)到100 g/L的高載量。
? 可以作為Protein A親和層析的后續(xù)純化步驟。
2. 在pH 5 以下具有耐鹽性
? 在pH 4.7、0.15 mol/L NaCl的緩沖液中可以對(duì)樣品進(jìn)行吸附。
? 在Protein A 親和層析或前處理后可以直接進(jìn)行上樣。
3. 硫酸根官能團(tuán)的特異性相互作用
? 與肝素親和層析相似,可以與凝血因子、疫苗或病毒結(jié)合。
? 可以用0-1 mol/L的NaCl進(jìn)行鹽梯度洗脫。
? 與競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的Sulfate填料具有類似的吸附性能,但是Sulfate-650F具有更高的吸附載量(某些填料由于孔徑小,所以蛋白只能結(jié)合在填料的表面)。
4. 常用的分離條件
? 上樣緩沖液的pH要控制在5.5以下。
? 優(yōu)化緩沖液的pH和鹽濃度能夠獲得更好的分離效果。
? 當(dāng)緩沖液的pH為4.2時(shí),即使在0.3mol/LNaCl的緩沖液中也能夠獲得很高的吸附載量。
六、多種不同的陽離子交換填料對(duì)單體和多聚體的分離度比較
在pH 5.5的緩沖液中,mAb單體和多聚體回收率的比較
七、TOYOPEARL Sulfate-650F在類似于肝素親和填料方面的應(yīng)用展望
1. 類似于肝素親和填料的分離純化作用*
? 凝血因子:Factor VII、Factor IX、Factor X、凝血酶、AT-III
? 組織纖溶酶原激活物(TPA)
? 脂肪酶、核酸酶有關(guān)(如限制性內(nèi)切酶)、膠原酶、脂蛋白
2. 利用硫酸根官能團(tuán)的相互作用*
? 病毒、疫苗
*目前使用TOYOPEARL Sulfate-650F純化的除了核糖核酸酶A和AT-III以外,暫時(shí)沒有其他實(shí)例。
八、單克隆抗體純化工藝實(shí)例
實(shí)例1.
實(shí)例2.
實(shí)例3.
九、訂貨信息
貨號(hào) | 描述 |
023468 | TOYOPEARL Sulfate-650F, 250ml |
023469 | TOYOPEARL Sulfate-650F,1L |
023470 | TOYOPEARL Sulfate-650F,5L |
023471 | TOYOPEARL Sulfate-650F,50L |
023472 | ToyoScreen Sulfate-650F, 1ml×6 |
023473 | ToyoScreen Sulfate-650F, 5ml×6 |
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